RESUMO: O objetivo deste trabalho foi avaliar a síntese de prolina e respostas fisiológicas de variedades de mandioca micropropagadas e induzidas ao estresse salino in vitro. Microestacas das variedades BRS Tapioqueira, BRS Verdinha e Lagoão previamente estabelecidas in vitro foram inoculadas em meio MS com diferentes concentrações de NaCl (0; 25; 50; 75; 100mM) e aos 90 dias foram analisados: número de raiz, número de folhas e massa seca de parte aérea. O teor de prolina das variedades BRS Tapioqueira e Lagoão foi analisado aos 30, 60 e 90 dias. Não houve análise de prolina da variedade Verdinha por causa da contaminação dos explantes. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 3 genótipos x 5 tratamentos salinos, com sete repetições para as variáveis de crescimento. Para o conteúdo de prolina foi considerado inteiramente casualizado subdividido no tempo, com genótipos e NaCl na parcela e o tempo na subparcela e duas repetições. Para os fatores variedade e tempo, foi utilizado o teste de Tukey (P<0,05) e para tratamentos salinos, teste de Regressão (P<0,05). A salinidade afetou o crescimento de todas as variedades, porém BRS Tapioqueira e BRS Verdinha mostraram-se menos afetadas pelo estresse salino induzido. Houve aumento no acúmulo de prolina a partir do incremento de sal, sendo então este, um indicador bioquímico de estresse salino em plantas de mandioca cultivadas in vitro.

ABSTRACT: The objective of this research was to evaluate the proline synthesis and physiological response of cassava genotypes which were micro propagated and induced to salinity stress in vitro. Micro cuttings of approximately 1.0cm long with a single bud of genotypes TBRS Tapioqueira, BRS Verdinha and Lagoão which were previously established in vitro were inoculated in a MS medium containing different concentrations of NaCl (0; 25; 50; 75; 100mM) and were analyzed after 90th day for: number of roots, number of leaves and shoot dry mass. The proline content of BRS Tapioqueira and Lagoão was assessed at 30th, 60th and 90th day. There was no analysis of proline of the variety Verdinha because of the contamination of the explants. The experimental design was completely randomized in double factorial scheme (3 genotypes x 5 salt treatments), with seven repetitions for growth variables. For comparing proline content, completely randomized design was used in a plot subdivided in time, with genotype and NaCl factors in plot and time in subplot, with two repetitions. For r time and genotypes Tukey test (P<0,05) was used and for NaCl levels regression test (P<0,05). Salinity affected the growth of all varieties; although, BRS Tapioqueira and BRS Verdinha were less affected by induced salt stress. There was an increase in the accumulation of proline from the salt increment, this synthesis of proline being a biochemical indicator of salt stress in cassava plants cultivated in vitro.

Objetivou-se testar diferentes concentrações de sais do meio de cultura Knudson C e ácido giberélico no crescimento in vitro de plântulas de orquídeas Hadrolaelia lobatta x Hadrolaelia purpurata Aço e Cattleya loddigesii. Plântulas, oriundas de sementes germinadas in vitro, com aproximadamente 1,0cm de comprimento, foram inoculadas em frascos com capacidade para 250cm³, contendo 60mL de meio de cultura Knudson C nas concentrações de 0; 50; 100 e 200% de sais minerais, acrescidos de GA3 (0; 2,5; 5; 7,5; 10mg L-1). As culturas foram mantidas em sala de crescimento com irradiância em torno de 35µmolm-2s-1, temperatura de 25±1°C e fotoperíodo de 16 horas. Ao final de 90 dias, observa-se que, para Cattleya loddigesii, o meio Knudson C a 200 %, promove maior crescimento in vitro, sendo que a adição de 2,5mg L-1 de GA3 é eficiente no incremento do número de folhas. Maior multiplicação é registrada em meio Knudson C na concentração original de seus sais (100%). Para Hadrolaelia lobatta x Hadrolaelia purpurata Aço, a concentração do meio Knudson C influencia o número de folhas (200% de sais) e brotos (50% de sais), mas não tem efeito no crescimento e biomassa. Não se verifica efeito do GA3 no número de brotos, comprimento de parte aérea e matéria fresca para os dois genótipos.

The aim of this research was to test different concentrations of culture medium Knudson C and gibberellic acid in the in vitro growth of Hadrolaelia lobatta x Hadrolaelia purpurata Aço and Cattleya loddigesii plantlets. Seedlings deriving from in vitro germinated seeds with approximately 1,0cm length, were inoculated in bottles of 250cm³ containing 60mL of Knudson C culture medium at salts concentrations of 0; 50; 100 e 200%, and supplemented with 0; 2.5; 5; 7.5; 10mg L-1 of GA3. The cultures were maintained in growth room with a 35µmolm-2s-1 irradiance, 16 hours photoperiod and 25±1°C of temperature. After 90 days, it is observed that the culture medium Knudson C 200% for Cattleya loddigesii promote better in vitro growth. The addition of GA3 (2.5mg L-1) is efficient in the number of leaves increment. Better in vitro multiplication is registered in Knudson C medium in the original concentration (100%). For Hadrolaelia lobatta x Hadrolaelia purpurata Aço, the concentration of Knudson C culture medium influences the number of leaves (salts 200%) and sprouts (salts 50%), but does not have effect in the growth and biomass. No effect of the GA3 in number of sprouts, length of aerial part and fresh mass for the two genotypes was verified.

O objetivo deste trabalho foi comparar diferentes métodos de micropropagação in vitro de abacaxizeiro em larga escala. Os tratamentos utilizados foram micropropagação convencional em meio sólido (5 e 6 g L-1 de ágar) e em meio líquido, e micropropagação em biorreator de imersão temporária - imersão no meio de cultura a cada 2, 4 e 8 horas, por 3 min - e contínua, com aeração a cada 2, 4 e 8 horas, por 3 min. Utilizou-se meio MS suplementado com 1 mg L-1 de BAP, 0,25 mg L-1 de ANA, pH ajustado para 5,8. As culturas foram mantidas em sala de crescimento com 25±1ºC, sob luz branca fria (40 µmol m-2 s-1 ), com 16 horas de fotoperíodo. O delineamento foi inteiramente casualizado, com nove tratamentos e quatro repetições. Depois de 45 dias de cultivo, foram avaliados número de brotos, brotações superiores a 1 cm, comprimento de brotos, massa de matéria fresca e massa de matéria seca de brotos. Sistemas de imersão temporária, com as plântulas imersas a cada 2 horas por 3 min, proporcionaram maior número, altura e massa de matéria seca de brotos de abacaxizeiro. O sistema de imersão temporária é o método mais eficiente na micropropagação de abacaxizeiro em larga escala.

The objective of this work was to compare different methods of pineapple in vitro mass micropropagation. The treatments were conventional micropropagation in solid medium (5 and 6 g L-1 agar) and in liquid medium, micropropagation in bioreactor of temporary immersion (immersion in culture medium each 2, 4 and 8 hours, for 3 minutes) and continuous immersion (with aeration each 2, 4 and 8 hours, for 3 minutes). MS medium supplement with 1 mg L-1 BAP, 0.25 mg L-1 NAA, and pH adjusted to 5.8 was utilized. Cultures were incubated at 25±1ºC under cool white fluorescent tubes (40 µmol m-2 s-1 ) with a 16-hours photoperiod. The experiment design was completely randomized, comprising nine treatments and four replicates. After 45 days, number of shootings, shootings higher than 1 cm, length of shootings, fresh matter of shootings and dry matter of shootings were evaluated. Temporary immersion system in each 2 hours for 3 minutes provided higher number, height and dry matter of pineapple shootings. Temporary immersion system is the most efficient method in pineapple mass micropropagation.

A micropropagação da amoreira-preta pode gerar plantas livres de vírus e em curto espaço de tempo. Com o objetivo de aprimorar técnicas de propagação in vitro de amoreira-preta (Rubus sp.), testaram-se concentrações de meio MS e BAP. Gemas axilares com cerca de 2 cm, de plântulas pré-estabelecidas in vitro da cultivar Ébano, oriunda da Embrapa Clima Temperado/CPACT-Pelotas, RS, foram excisadas e inoculadas em meio MS (0, 50, 100, 150 e 200%), suplementado com concentrações de BAP (0; 0,5; 1,0; 2,0 e 4,0 mg L-1). O experimento foi inteiramente casualizado, utilizando-se de três explantes por repetição. O pH do meio foi ajustado para 5,8 antes da adição de 6 g L-1 de ágar e da autoclavagem a 121ºC e 1 atm por 20 minutos. Após a inoculação, os explantes foram mantidos por 60 dias em sala de crescimento a 27±1ºC, irradiância de 35 µM.m-2.s-1 e fotoperíodo de 16 horas, avaliando-se número de folhas, número e comprimento dos brotos, número de raízes, peso da matéria fresca e seca da parte aérea. Melhores resultados foram obtidos em meio MS 150%, em que foi observado maior número de folhas (7,89) e de brotos (3,99), acrescidos de 1 mg L-1 de BAP. Na ausência de reguladores de crescimento, o número de raízes apresentou melhor desenvolvimento, sem a formação de calos.

With the objective to micropropagation the blackberry (Rubus sp.), cv. Ébano, nodal segments of plants in vitro, originated from Embrapa Clima Temperado/CPACT-Pelotas, RS, were inoculated in MS culture medium (0, 50, 100, 150 and 200%), suplemented with different BAP concentrations (0; 0,5; 1,0; 2,0 and 4,0 mg L-1). The pH was adjusted for 5,8 before adding 6 g L-1 agar and before the esterilization at 121ºC and 1 atm for 20 minutes. After the inoculation, the explants were maintained by 60 days, in growth room, 27±1ºC, 35 µM m-2 s-1 and photoperiod 16 hours. The experiment was randomized complete blocks, using three explants by repetition. Better results were obtained with 150% MS medium, where the largest number (7,89) and sprouts (3,99) were observed, added of 1 mg L-1 de BAP. In the absence of BAP the number of roots had presented better development, without the callus's formation.